Abstrato

Glucoamilase ácido-termoestável, degradante do amido cru de Aspergillus fumigatus CFU-01: Purificação e caracterização para aplicação biotecnológica

Adeyemi O Ayodeji, Frank A Ogundolie, Olufemi S Bamidele, Ayodele O Kolawole e Joshua O Ajele

As melhorias no processo industrial envolvido na degradação do amido levaram à procura de enzimas amilolíticas termoestáveis ??e amantes do sal , especialmente a glucoamilase, uma enzima que pode hidrolisar completamente o amido em glicose. Nesta investigação, a glucoamilase foi produzida de forma ideal em cultura líquida de Aspergillus fumigatus e purificada até à homogeneidade por precipitação com sulfato de amónio, cromatografia de troca iónica e filtração em gel, proporcionando um rendimento de 8,19% com uma purificação de 20 vezes . A glucoamilase de 50 kDa, peso molecular estimado por Eletroforese em Gel de Poliacrilamida com Dodecil Sulfato de Sódio (SDS-PAGE) foi altamente estável numa ampla gama de pH na região ácida e também termoestável; retendo cerca de 70% da atividade inicial após 60 min de incubação a 60ºC. A enzima purificada foi activa sobre amilose, dextrano e diferentes amidos com valores de Km _e V _max de 1,59 mg/mL e 14,33 U/mg respectivamente, quando foi utilizado amido de mandioca cru como substrato. Notavelmente, esta glucoamilase apresenta uma elevada propriedade de tolerância ao sal , com cerca de 50% de atividade residual após 24 h de incubação em solução de NaCl 3,0 M. Alguns iões metálicos incluindo o K ⁺ , Ca ²⁺ e Mg ²⁺ foram activadores da enzima enquanto que o Cu ²⁺ , Pb ²⁺ e Hg ²⁺ inibiram a sua actividade. As características bioquímicas únicas desta glucoamilase qualificam-na para uso biotecnológico especialmente nas indústrias alimentar, farmacêutica e de biocombustíveis .