Saleem Basha e Kandasamy Ulaganathan
Uma enzima quitinase, Chi25, foi purificada a partir do sobrenadante da estirpe cultivada de Bacillus subtilis BC121 por precipitação com sulfato de amónio e cromatografia de afinidade com quitina. A pureza da enzima foi confirmada por análise de SDS-PAGE e RP-HPLC e o peso molecular da enzima foi estimado em aprox. 25 kDa. A enzima foi estável numa gama de pH de 6 a 7,5, enquanto o pH ótimo para a atividade enzimática foi de 6,5. O Chi25 foi estável numa gama de temperaturas de 25 a 40 °C, sendo 35 °C a temperatura ideal para a atividade. O bioensaio de Chi25 demonstrou a inibição da germinação de esporos e extensão de hifas de importantes fungos fitopatogénicos. Os resultados dos ensaios em estufa revelaram que a estirpe de tipo selvagem (BC121) reduziu a incidência da murchidão de fusarium em 80%. A análise comparativa tanto da estirpe de tipo selvagem (BC121) como da estirpe mutante desta bactéria (BC121M) revelou que o antagonismo da estirpe BC121 contra fungos patogénicos de plantas tanto in vitro como in vivo é devido à enzima Chi25.