Abstrato

Efeitos do Scriptaid no ciclo celular e na acetilação de histonas de células cumulus de dadores nucleares ovinos e a sua capacidade de apoiar o desenvolvimento de embriões de transferência nuclear de células somáticas

Hui Cao, Wenlong Su, Junjie Li, Bingqiang Wen, Shujun Tian, ​​​​Shuchun Sun, Lu Li, Hanyang Wang e Jiexin Li

Evidências convincentes sugerem que o inibidor da histona desacetilase (HDACi) influencia o desenvolvimento de embriões de transferência nuclear de células somáticas (SCNT). O presente estudo foi conduzido para determinar o efeito do pré-tratamento de células cumulus de dadores com Scriptaid (um novo HDACi) no ciclo celular, acetilação de histonas e desenvolvimento de embriões de clonagem em ovinos. Em primeiro lugar, otimizámos a eficiência do Scriptaid de forma dose (0, 0,1, 0,2, 0,4 e 0,8 μmol/L) e dependente do tempo (0, 12, 24, 36 e 48 h) na capacidade de desenvolvimento destes embriões . De seguida, avaliámos quantitativamente as alterações dos níveis de acetilação na histona H3 lisina 9 (acH3K9) e na histona H4 lisina 12 (acH4K12) das células do cumulus e dos embriões SCNT por coloração de imunofluorescência. Além disso, detetámos a proporção de células da fase G0/G1 nas células do cumulus. Verificámos taxas de desenvolvimento de blastocistos significativamente melhoradas na clonagem de embriões derivados de células cumulus de dadores pré-tratadas com uma dose ligeira (0,2 μmol/L) de Scriptaid durante 24 horas (21/86 [24,39%] vs. 11/85 [12,91%]; P<0,05). Enquanto isso, os níveis de acH3K9 e acH4K12 também melhoraram significativamente nas células cumulus e nos embriões SCNT (P<0,05). Além disso, mais células do cumulus pré-tratadas com Scriptaid estavam na fase G0/G1 em comparação com o grupo controlo (84,22% vs. 75,96%, P<0,05). Em conclusão, as células do cumulus doadas tratadas com Scriptaid são benéficas para o desenvolvimento inicial dos embriões SCNT, aumentando a proporção de células da fase acH3K9 / acH4K12 e G0 / G1 das células do cumulus. O Scriptaid pode ser utilizado para melhorar a eficiência da transferência nuclear de células somáticas em ovinos.