Abstrato

Indução de danos ao DNA, apoptose celular e ponto de verificação do ciclo celular pelo uso de kaempferol

Damin Liang1, Xiaoju Cheng2, Ziping Zhang1, Zhengjiu Yang1, Tingchao Li 3*, Peng Tian3,2*

Objetivo: A resistência a medicamentos é a principal causa de falha da quimioterapia no carcinoma hepatocelular. Kaempferol (KAE) é um composto flavonoide natural, que tem um certo efeito de aumento da quimiosensibilidade. No entanto, o potencial mecanismo molecular do KAE revertendo a resistência a medicamentos no carcinoma hepatocelular permanece obscuro.

Métodos: RT-qPCR foi usado para avaliar o efeito de interferência de siDNAPKcs. Ensaios de RT-qPCR e WB foram usados ??para detectar a expressão de mRNA e proteína de genes relacionados ao reparo de danos ao DNA (γ-H2AX, DNA-PKcs, Artemis) e gene de bomba de entrega de fármacos (P-gp). Citometria de fluxo foi usada para detectar o ciclo celular e a apoptose.

Resultados: Neste estudo, descobrimos que o KAE aumentou significativamente os níveis de mRNA e proteína de γ-H2AX e regulou negativamente os níveis de mRNA e proteína de DNA-PKcs e Artemis, por outro lado, também regulou negativamente os níveis de mRNA e proteína de P-gp e, finalmente, promoveu conjuntamente o dano ao DNA, a apoptose celular e a parada do ciclo celular na fase G2/M de células Bel-7402/5-Fu resistentes a medicamentos. Mecanicamente, o KAE promoveu principalmente a degradação de DNA-PKcs por meio da via do proteassoma da ubiquitina, regulou negativamente o nível de proteína de DNA-PKcs, inibiu a via DNA-PKcs/Artemis e promoveu dano ao DNA, induziu a apoptose celular e a parada do ciclo celular.

Conclusão: KAE pode ser usado como um sensibilizador para o tratamento clínico da resistência à quimioterapia do CHC, e a inibição de DNA-PKcs também pode se tornar uma nova estratégia e alvo para o tratamento do CHC.