Abstrato

Estudos de cinética enzimática da nucleosídeo difosfato cinase em eritrócitos humanos e distribuição de frequência em indivíduos saudáveis ??e receptores de transplante na população chinesa Han

Rufei Shen, Chunxiao Yang, Xiaomei Luo, Tingyu Yang, Jiali Zhou, Yani Liu, Shaojun Shi*

A nucleosídeo difosfato quinase (NDPK), como uma proteína de manutenção, envolve vários processos moleculares, incluindo transdução de sinal, energia e metabolismo de medicamentos. O objetivo principal foi investigar a cinética da NDPK em eritrócitos humanos e monitorar a distribuição de frequência dos níveis de atividade da NDPK em indivíduos chineses saudáveis ??e receptores de transplantes. MÉTODOS: A atividade da NDPK em eritrócitos foi detectada por um método validado de cromatograma líquido de alto desempenho de par iônico. Estudos de cinética da NDPK foram realizados sistematicamente. Os níveis de atividade da NDPK foram determinados em 500 indivíduos saudáveis, 250 receptores de transplante de rim e 250 de fígado na população chinesa Han. RESULTADOS: Estudos de estabilidade térmica e de pH indicaram que a NDPK era relativamente estável em temperaturas de 30-45ºC e pH 6,0-9,0. No estudo de dependência de substrato, a constante aparente de Michaelis-Menten (Km) e a velocidade máxima da reação enzimática (Vmax) aumentaram com a concentração de substratos. Enquanto isso, no estudo de inibição do produto, com o aumento da concentração de dATP, o Vmax do dADP diminuiu com Km constante e o Km do dGTP aumentou com Vmax constante. Os níveis de atividade do NDPK revelaram uma variabilidade de 7 vezes e não foram distribuídos normalmente em todos os grupos. Os níveis de atividade do NDPK foram significativamente (P<0,05) maiores no grupo de transplante do que no grupo de saúde. Além disso, níveis muito maiores de atividade do NDPK foram mostrados (P<0,001) em receptores de transplante de fígado quando comparados a casos de transplante de rim. CONCLUSÕES: Estudos de cinética do NDPK indicaram dependência de substrato do NDPK e um mecanismo de "pingue-pongue" para inibição da produção. Distribuições de assimetria dos níveis de atividade do NDPK foram mostradas na população do estudo. Os receptores de transplante mostraram níveis maiores de atividade do NDPK quando comparados a indivíduos saudáveis.