Anjali Jaiwal 1 , Natarajaswamy Kalleda 2 e Manchikatla Venket Rajam 1
A Helicoverpa armigera é um inseto praga polífago responsável por grandes perdas no algodão e noutras culturas agronomicamente importantes. A interferência por RNA (RNAi) surgiu como uma potencial alternativa para criar plantas resistentes a insetos através da expressão in planta de dsRNA específico para um gene vital de inseto. No presente estudo, os genes da biossíntese hormonal em H. armigera foram alvo através da alimentação de dsRNAs correspondentes a cada gene alvo, viz. Metil transfererase ácida de hormona juvenil (HaJHAMT), hormona pró-toracicotrópica (HaPTTH), peptídeo ativador da biossíntese de feromonas (HaPBAP), fator de transcrição regulador da muda (HaHR3), proteína ativada 4 (HaAP-4) e precursor da hormona de eclosão (HaEHP) que desempenham papéis importantes na regulação de eventos fisiológicos, de desenvolvimento e comportamentais na praga de insetos alvo. A ingestão de dsRNAs do gene alvo através de dieta artificial resultou numa mortalidade variável que variou entre 60-92% em todos os seis genes alvo. O silenciamento dos genes alvo mostrou um crescimento retardado das larvas, atraso na muda, metamorfose e formação de pupas. Uma comparação da potência de silenciamento do dsRNA HaPTTH longo não cortado em cubos com os siRNAs cortados em cubos com RNase III revelou que os dsRNAs longos foram mais eficazes no silenciamento do gene alvo em comparação com os siRNAs. Verificou-se que o HaPTTH-dsRNA revestido na folha destacada é mais eficaz no silenciamento do gene alvo quando comparado com a alimentação com dsRNA através de uma dieta artificial. As análises qRT-PCR mostraram que o nível de mRNA de seis genes alvo foi drasticamente reduzido em comparação com o controlo ou controlo não relacionado de GFP-dsRNA correlacionado com os defeitos de desenvolvimento. Estes resultados indicam que os genes da biossíntese hormonal podem ser utilizados como alvos vitais para melhorar a resistência a pragas no algodão e noutras plantas infestadas com H. armigera. A impedância de RNA (RNAi) foi criada como um procedimento inovador na exploração da genómica utilitária, assim como o controlo de problemas das plantas. Neste relatório, dois RNA abandonados (dsRNA) com foco na qualidade da 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima A redutase (HMGR), que catalisam uma resposta enzimática de restrição de velocidade na via do mevalonato da amálgama da hormona adolescente (JH) na lagarta do algodão, foi comunicado em plantas de algodão através de uma mudança intercedida por Agrobacterium tumefaciens. A investigação de PCR e Sothern descobriu a coordenação da qualidade do HMGR no genoma do algodão. A RT-PCR e a qRT-PCR afirmaram o elevado nível de tradução do dsHMGR em linhagens de algodão transgénico. A articulação do HMGR, tanto a nível de interpretação como de interpretação, foi totalmente regulada negativamente em crias de lagartas do algodoeiro (Helicoverpa armigera) após beneficiarem das folhas de plantas HMGR transgénicas. O nível de interpretação da qualidade do HMGR em crias criadas em folhas de algodão transgénico foi até 80,68% inferior ao do tipo selvagem. Além do mais, o nível relativo de articulação da qualidade da vitelogenina (Vg, fonte vital de sustento para o desenvolvimento do organismo subdesenvolvido da posteridade) também foi diminuído em 76.86% quando as crias de insetos foram tratadas com folhas transgénicas. O efeito secundário dos bioensaios com insetos demonstrou que a planta transgénica contendo dsHMGR restringiu o ganho de peso líquido, bem como adiou o desenvolvimento das crias de lagarta do algodão. Em conjunto, os dsRNAs de comunicação de plantas de algodão transgénicos reduziram efetivamente a qualidade do HMGR e prejudicaram o rumo dos acontecimentos e a resistência do alvo rastejante, o que deu mais alternativas ao controlo de insetos nas plantas. Frases de efeito: 3-hidroxi-3-metilglutaril coenzima A redutase (HMGR), lagarta do algodão, obstrução por RNA, algodão transgénico, RNAs duplos abandonados, controlo de problemas. O algodão (Gossypium hirsutum) é uma fibra significativa e um rendimento monetário em toda a parte, o que mostra uma essencialidade proeminente na criação de culturas. Os incómodos e os organismos patogénicos são os principais motivos de preocupação para a rentabilidade e a natureza do algodão. Neste momento, a irritação significativa na criação do algodão é a lagarta do algodão (Helicoverpa armigera). Apesar do amplo desenvolvimento de algodão transgénico rastejante rastejante seguro BT indicando enormes superioridades financeiras e sociais 1, as transformações da qualidade da lagarta entre as idades e as escolhas que surgem por causa das proteínas seguras contra insetos BT abençoam a lagarta com proteção contra culturas transgénicas BT 2-6. Doravante, as culturas transgénicas de obstrução rastejante e rastejante com procedimentos eletivos são atraentes. A obstrução por RNA (RNAi), um instrumento de silenciamento de qualidade viável em eucariotas, foi encontrada em Caenorhabditis elegans 7 apenas porque e posteriormente criada como uma estrutura segura contra insetos numa grande variedade de espécies de plantas 8, 9. O RNA de fita dupla (dsRNA) pode podem ser criados por tradução interna, transposão, transgénese falsa e contaminação por infecção de RNA, que são percebidos e deteriorados em pequenos RNAs intrometidos (siRNA) pela endorribonuclease Dicer. O complexo de silêncio estimulado por RNA (RISC), incluindo o siRNA e alguns produtos químicos, por exemplo, endonucleases, exonucleases e helicases, exibe a capacidade das nucleases de perceber e separar o RNA objetivo explícito 10. Neste sentido, o RNAi pode ser utilizado erradamente para restringir a saída de qualidade endógena. Partilhando o instrumento atómico normal de arranjo explícito de qualidade numa grande variedade de variedades animais, o RNAi ativado por dsRNA exógeno foi criado como um dos aparelhos mais produtivos para a exploração da capacidade de qualidade 11, bem como para o controlo de incómodos 12-16. O dsRNA criado por plantas transgénicas contra as principais qualidades de irritações tem sido visto como um escudo que enriquece as plantas vermes transgénicas seguras com novos avanços 17, 18. A lagarta do algodão passa por um complexo processo de eliminação no seu ciclo de vida, cujo desenvolvimento e melhoria são controlados coordenadamente pela hidroxiecdisona 19 -22 e pela hormona do adolescente (JH) 22. Os análogos do JH foram falsamente integrados e trouxeram novas originalidades ao trabalho inovador essencial do pesticida 23.O uso frutífero de análogos hormonais identificados com o processo de eliminação demonstrou que a impedância ou exagero de hormonas essenciais poderia ser outra metodologia para o bug coordenado (IPM) de rastejadores assustadores que têm um lugar no Filo Arthropoda 24. Neste sentido, as qualidades críticas ou fatores de interpretação associados às vias de biossíntese hormonal são inclinados a serem utilizados como alvos perfeitos quando a inovação do RNAi é aplicada ao controlo de insetos 25. O JH é integrado através da via do mevalonato em rastejantes assustadores, nos quais o mevalonato é um dos intermédios mais significativos. O HMG-CoA, o antecedente da via do mevalonato, é obrigado a experimentar três respostas enzimáticas para ser transformado em mevalonato, e o HMGR catalisa e gere a última resposta 26. Desta forma, o HMGR liga um avanço restritivo na biossíntese do mevalonato, surgindo como um objetivo promissor para a inovação de RNAi para o controlo de rastejantes assustadores 27, 28. Além disso, a biossíntese de vitelogenina, o sustento significativo para o avanço de organismos não desenvolvidos da posteridade, também pode ser prejudicada pela regulação negativa da qualidade de HMGR em B.germanica 27. No nosso relatório anterior, um cDNA completo de 3329 pb (número de aumento do GenBank GU584103) de qualidade HaHMGR foi clonado pela inovação RACE. Uma secção de 1176 pb no arranjo codificador de HaHMGR foi intensificada a partir do cDNA da lagarta do algodão e utilizada para criar dsRNA. Ao infundir dsHMGR na parte média da pupa com 2 dias de idade, verificámos que a quantidade de ovos postos diminuiu e a articulação geral da qualidade do HMGR e do Vg foi regulada negativamente nas crias testadas 27. Biografia Anjali Jaiwal está a frequentar o doutoramento sob a supervisão do Professor MV Rajam, Chefe do Departamento de Genética, Campus Sul da Universidade de Deli, Nova Deli, Índia. Fez a sua pós-graduação em Biotecnologia na MD University, Rohtak, Haryana e recebeu a medalha de ouro por ter ficado em primeiro lugar na universidade. Recebeu várias bolsas durante a Licenciatura e Pós-Graduação. Ela clonou e submeteu três sequências genéticas ao GenBank do NCBI. Publicou um artigo de revisão 'Produção de coenzima Q10 em plantas: estado atual e perspetivas futuras' em 'Revisões Críticas em Biotecnologia' como segunda autora. Participou em seis conferências nacionais e três internacionais. Foi galardoada com o prémio CSIR-UGC JRF e com a prestigiada bolsa DST-INSPIRE do DST (Departamento de Ciência e Tecnologia). O seu trabalho de investigação inclui o rastreio de alguns genes vitais de Helicoverpa armigera, a alimentação de dsRNAs do gene alvo para a praga de insetos através de uma dieta artificial semi-sintética e o desenvolvimento de plantas transgénicas de tabaco e algodão resistentes a insetos através do silenciamento de RNAi mediado por plantas de genes vitais de H. armigera .as qualidades críticas ou fatores de interpretação associados às vias de biossíntese hormonal são enviesados ??para serem utilizados como alvos perfeitos quando a inovação do RNAi é aplicada ao controlo de insetos 25. O JH é integrado através da via do mevalonato em rastejantes assustadores, nos quais o mevalonato é um dos mais significativos intermediários. O HMG-CoA, o antecedente da via do mevalonato, é obrigado a experimentar três respostas enzimáticas para ser transformado em mevalonato, e o HMGR catalisa e gere a última resposta 26. Desta forma, o HMGR liga um avanço restritivo na biossíntese do mevalonato, surgindo como um objetivo promissor para a inovação de RNAi para o controlo de rastejantes assustadores 27, 28. Além disso, a biossíntese de vitelogenina, o sustento significativo para o avanço de organismos não desenvolvidos da posteridade, também pode ser prejudicada pela regulação negativa da qualidade de HMGR em B.germanica 27. No nosso relatório anterior, um cDNA completo de 3329 pb (número de aumento do GenBank GU584103) de qualidade HaHMGR foi clonado pela inovação RACE. Uma secção de 1176 pb no arranjo codificador de HaHMGR foi intensificada a partir do cDNA da lagarta do algodão e utilizada para criar dsRNA. Ao infundir dsHMGR na parte média da pupa com 2 dias de idade, verificámos que a quantidade de ovos postos diminuiu e a articulação geral da qualidade do HMGR e do Vg foi regulada negativamente nas crias testadas 27. Biografia Anjali Jaiwal está a frequentar o doutoramento sob a supervisão do Professor MV Rajam, Chefe do Departamento de Genética, Campus Sul da Universidade de Deli, Nova Deli, Índia. Fez a sua pós-graduação em Biotecnologia na MD University, Rohtak, Haryana e recebeu a medalha de ouro por ter ficado em primeiro lugar na universidade. Recebeu várias bolsas durante a Licenciatura e Pós-Graduação. Ela clonou e submeteu três sequências genéticas ao GenBank do NCBI. Publicou um artigo de revisão 'Produção de coenzima Q10 em plantas: estado atual e perspetivas futuras' em 'Revisões Críticas em Biotecnologia' como segunda autora. Participou em seis conferências nacionais e três internacionais. Foi galardoada com o prémio CSIR-UGC JRF e com a prestigiada bolsa DST-INSPIRE do DST (Departamento de Ciência e Tecnologia). O seu trabalho de investigação inclui o rastreio de alguns genes vitais de Helicoverpa armigera, a alimentação de dsRNAs do gene alvo para a praga de insetos através de uma dieta artificial semi-sintética e o desenvolvimento de plantas transgénicas de tabaco e algodão resistentes a insetos através do silenciamento de RNAi mediado por plantas de genes vitais de H. armigera .as qualidades críticas ou fatores de interpretação associados às vias de biossíntese hormonal são enviesados ??para serem utilizados como alvos perfeitos quando a inovação do RNAi é aplicada ao controlo de insetos 25. O JH é integrado através da via do mevalonato em rastejantes assustadores, nos quais o mevalonato é um dos mais significativos intermediários. O HMG-CoA, o antecedente da via do mevalonato, é obrigado a experimentar três respostas enzimáticas para ser transformado em mevalonato, e o HMGR catalisa e gere a última resposta 26. Desta forma, o HMGR liga um avanço restritivo na biossíntese do mevalonato, surgindo como um objetivo promissor para a inovação de RNAi para o controlo de rastejantes assustadores 27, 28. Além disso, a biossíntese de vitelogenina, o sustento significativo para o avanço de organismos não desenvolvidos da posteridade, também pode ser prejudicada pela regulação negativa da qualidade de HMGR em B.germanica 27. No nosso relatório anterior, um cDNA completo de 3329 pb (número de aumento do GenBank GU584103) de qualidade HaHMGR foi clonado pela inovação RACE. Uma secção de 1176 pb no arranjo codificador de HaHMGR foi intensificada a partir do cDNA da lagarta do algodão e utilizada para criar dsRNA. Ao infundir dsHMGR na parte média da pupa com 2 dias de idade, verificámos que a quantidade de ovos postos diminuiu e a articulação geral da qualidade do HMGR e do Vg foi regulada negativamente nas crias testadas 27. Biografia Anjali Jaiwal está a frequentar o doutoramento sob a supervisão do Professor MV Rajam, Chefe do Departamento de Genética, Campus Sul da Universidade de Deli, Nova Deli, Índia. Fez a sua pós-graduação em Biotecnologia na MD University, Rohtak, Haryana e recebeu a medalha de ouro por ter ficado em primeiro lugar na universidade. Recebeu várias bolsas durante a Licenciatura e Pós-Graduação. Ela clonou e submeteu três sequências genéticas ao GenBank do NCBI. Publicou um artigo de revisão 'Produção de coenzima Q10 em plantas: estado atual e perspetivas futuras' em 'Revisões Críticas em Biotecnologia' como segunda autora. Participou em seis conferências nacionais e três internacionais. Foi galardoada com o prémio CSIR-UGC JRF e com a prestigiada bolsa DST-INSPIRE do DST (Departamento de Ciência e Tecnologia). O seu trabalho de investigação inclui o rastreio de alguns genes vitais de Helicoverpa armigera, a alimentação de dsRNAs do gene alvo para a praga de insetos através de uma dieta artificial semi-sintética e o desenvolvimento de plantas transgénicas de tabaco e algodão resistentes a insetos através do silenciamento de RNAi mediado por plantas de genes vitais de H. armigera .O HMGR conecta um avanço restritivo na biossíntese de mevalonato, surgindo como um objetivo promissor para a inovação de RNAi para o controlo de rastejantes assustadores 27, 28. Além disso, a biossíntese de vitelogenina, o sustento significativo para o avanço de organismos subdesenvolvidos da posteridade, também pode ser prejudicada pela regulação negativa da qualidade do HMGR em B.geranica 27. No nosso relatório anterior, um cDNA completo de 3329 pb (aumento do GenBank no. GU584103) de qualidade HaHMGR foi clonado pela inovação RACE. Uma secção de 1176 pb no arranjo codificador de HaHMGR foi intensificada a partir do cDNA da lagarta do algodão e utilizada para criar dsRNA. Ao infundir dsHMGR na parte média da pupa com 2 dias de idade, verificámos que a quantidade de ovos postos diminuiu e a articulação geral da qualidade do HMGR e do Vg foi regulada negativamente nas crias testadas 27. Biografia Anjali Jaiwal está a frequentar o doutoramento sob a supervisão do Professor MV Rajam, Chefe do Departamento de Genética, Campus Sul da Universidade de Deli, Nova Deli, Índia. Fez a sua pós-graduação em Biotecnologia na MD University, Rohtak, Haryana e recebeu a medalha de ouro por ter ficado em primeiro lugar na universidade. Recebeu várias bolsas durante a Licenciatura e Pós-Graduação. Ela clonou e submeteu três sequências genéticas ao GenBank do NCBI. Publicou um artigo de revisão 'Produção de coenzima Q10 em plantas: estado atual e perspetivas futuras' em 'Revisões Críticas em Biotecnologia' como segunda autora. Participou em seis conferências nacionais e três internacionais. Foi galardoada com o prémio CSIR-UGC JRF e com a prestigiada bolsa DST-INSPIRE do DST (Departamento de Ciência e Tecnologia). O seu trabalho de investigação inclui o rastreio de alguns genes vitais de Helicoverpa armigera, a alimentação de dsRNAs do gene alvo para a praga de insetos através de uma dieta artificial semi-sintética e o desenvolvimento de plantas transgénicas de tabaco e algodão resistentes a insetos através do silenciamento de RNAi mediado por plantas de genes vitais de H. armigera .O HMGR conecta um avanço restritivo na biossíntese de mevalonato, surgindo como um objetivo promissor para a inovação de RNAi para o controlo de rastejantes assustadores 27, 28. Além disso, a biossíntese de vitelogenina, o sustento significativo para o avanço de organismos subdesenvolvidos da posteridade, também pode ser prejudicada pela regulação negativa da qualidade do HMGR em B.geranica 27. No nosso relatório anterior, um cDNA completo de 3329 pb (aumento do GenBank no. GU584103) de qualidade HaHMGR foi clonado pela inovação RACE. Uma secção de 1176 pb no arranjo codificador de HaHMGR foi intensificada a partir do cDNA da lagarta do algodão e utilizada para criar dsRNA. Ao infundir dsHMGR na parte média da pupa com 2 dias de idade, verificámos que a quantidade de ovos postos diminuiu e a articulação geral da qualidade do HMGR e do Vg foi regulada negativamente nas crias testadas 27. Biografia Anjali Jaiwal está a frequentar o doutoramento sob a supervisão do Professor MV Rajam, Chefe do Departamento de Genética, Campus Sul da Universidade de Deli, Nova Deli, Índia. Fez a sua pós-graduação em Biotecnologia na MD University, Rohtak, Haryana e recebeu a medalha de ouro por ter ficado em primeiro lugar na universidade. Recebeu várias bolsas durante a Licenciatura e Pós-Graduação. Ela clonou e submeteu três sequências genéticas ao GenBank do NCBI. Publicou um artigo de revisão 'Produção de coenzima Q10 em plantas: estado atual e perspetivas futuras' em 'Revisões Críticas em Biotecnologia' como segunda autora. Participou em seis conferências nacionais e três internacionais. Foi galardoada com o prémio CSIR-UGC JRF e com a prestigiada bolsa DST-INSPIRE do DST (Departamento de Ciência e Tecnologia). O seu trabalho de investigação inclui o rastreio de alguns genes vitais de Helicoverpa armigera, a alimentação de dsRNAs do gene alvo para a praga de insetos através de uma dieta artificial semi-sintética e o desenvolvimento de plantas transgénicas de tabaco e algodão resistentes a insetos através do silenciamento de RNAi mediado por plantas de genes vitais de H. armigera .Fez a sua pós-graduação em Biotecnologia na MD University, Rohtak, Haryana e recebeu a medalha de ouro por ter ficado em primeiro lugar na universidade. Recebeu várias bolsas durante a Licenciatura e Pós-Graduação. Ela clonou e submeteu três sequências genéticas ao GenBank do NCBI. Publicou um artigo de revisão 'Produção de coenzima Q10 em plantas: estado atual e perspetivas futuras' em 'Revisões Críticas em Biotecnologia' como segunda autora. Participou em seis conferências nacionais e três internacionais. Foi galardoada com o prémio CSIR-UGC JRF e com a prestigiada bolsa DST-INSPIRE do DST (Departamento de Ciência e Tecnologia). O seu trabalho de investigação inclui o rastreio de alguns genes vitais de Helicoverpa armigera, a alimentação de dsRNAs do gene alvo para a praga de insetos através de uma dieta artificial semi-sintética e o desenvolvimento de plantas transgénicas de tabaco e algodão resistentes a insetos através do silenciamento de RNAi mediado por plantas de genes vitais de H. armigera .Fez a sua pós-graduação em Biotecnologia na MD University, Rohtak, Haryana e recebeu a medalha de ouro por ter ficado em primeiro lugar na universidade. Recebeu várias bolsas durante a Licenciatura e Pós-Graduação. Ela clonou e submeteu três sequências genéticas ao GenBank do NCBI. Publicou um artigo de revisão 'Produção de coenzima Q10 em plantas: estado atual e perspetivas futuras' em 'Revisões Críticas em Biotecnologia' como segunda autora. 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