Abstrato

Um método de cromatografia líquida – espectrometria de massa para a determinação de ácido alfa-cetoglutárico em plasma humano.

Gundoju Suresh, PE Thirugnanam e Atmakuru Ramesh

O ácido alfa-cetoglutárico (A-KG) está atualmente sob investigação como um promissor agente de dano às células cancerígenas e antídoto para cianeto. Um método simples e específico de cromatografia líquida-espectrometria de massa (LC-MS/MS) foi desenvolvido para a determinação quantitativa de A-KG em plasma humano. A derivatização de A-KG foi obtida usando N-metil imidazol na presença de anidrato trifluroacético. Vários parâmetros, que afetaram o rendimento da reação de derivatização, como temperatura e tempo de reação, foram otimizados. Um derivado imidazol de A-KG foi extraído usando éter butílico terciário metílico e quantificado no modo de ionização por spry de elétrons positivos (razão massa-carga (m/z):197). O método foi totalmente validado usando parâmetros como especificidade, linearidade, limite de detecção e quantificação, precisão, exatidão, recuperação, robustez e robustez. A linearidade foi demonstrada na faixa de concentração de 100-2500 ng mL-1 com um coeficiente de correlação (R2) de 0,9991. O limite de detecção e quantificação foi encontrado em 40 e 100 ng mL-1, respectivamente. A precisão e a exatidão intra e interdia estavam dentro do limite aceitável (<8%). A robustez e a robustez foram avaliadas usando o delineamento experimental Plackett-Burman.