Abstrato

Um protocolo simples para extrair ADN de tecido de minhoca para estudos moleculares

Kushwaha T, Vishwakarma A, Rahul Paliwal, Sashidhar Burla e Shweta Yadav

Foi desenvolvido um protocolo simples para extrair ADN de alta qualidade de diferentes espécies de minhocas da família Moniligastridae (Drawida travancorensis D.pellucida, D.parambikimala, D.modesta); Megascolecidae (Perionyx sansibaricus); Octochaetidae (Travoscolides chengannures); Lumbricidae (Octolasion cyaneum,Eisenia andrei, E. fetida) Eudrilidae (Eudrilus eugeniae) recolhidos em Gates Ocidentais da Índia. Obteve-se uma boa quantidade (261,6 a 151 μg/μl) de ADN. Com o presente protocolo modificado. A relação de A260/A280 também se situou no intervalo de 1,91 a 1,98, enquanto o protocolo de rotina foi registado em 1,48 a 2,24 μg/μl. O ADN extraído foi utilizado para amplificar 683 pb do gene da citocromo oxidase I (COI) com os primers LCO1490 e HCO2198. Todas as sequências do gene amplificado foram alinhadas, editadas e analisadas pelo método de Máxima Verosimilhança para caracterizar diferentes espécies de minhocas. Parece que o protocolo modificado utilizado no presente estudo foi eficiente e fácil de extrair ADN de boa qualidade de diferentes espécies de minhocas.