Priyadarshini N. Canning
Objectivo: Observar os efeitos do factor de crescimento básico de fibroblastos e do factor neurotrófico derivado da linhagem de células gliais na cultura 2D e 3D determinando a taxa de sobrevivência celular, a proliferação celular e a função de secreção de insulina dos esferóides das células beta pancreáticas (células β) após tratamento com diferentes doses destes fatores de crescimento in vitro.
Desenho: células betaTC-6 cultivadas em culturas de monocamada e esferóide foram tratadas com três doses diferentes de FGF-2 (10.100.1000ng/mL) e GDNF (100.200.400 ng/mL). Foi utilizado um ensaio WST-8 baseado em células para determinar a proliferação e a taxa de sobrevivência das células β em ambos os modelos de cultura. O ELISA de insulina foi realizado para determinar a função de secreção de insulina in vitro.
Resultados: Os resultados obtidos na cultura 2D diferem marcadamente dos resultados obtidos na cultura 3D. Os esferóides semeados a 500 e 1000 células/esferóide apresentaram uma proliferação celular melhorada quando tratados com 10 ng/mL de FGF-2. No entanto, esta mesma dose de FGF-2 apresentou efeitos citotóxicos nas culturas 2D500 e 2D1000. Os esferóides S500 tratados com GDNF apresentaram uma elevada proliferação celular em todas as doses de GDNF. As culturas 2D500 apresentaram uma ligeira melhoria na proliferação celular a 100 e 400 ng/mL, mas não apresentaram qualquer melhoria a 200 ng/mL de GDNF.
Conclusão: Recentemente, os modelos de cultura 3D estão a ganhar popularidade em estudos como a descoberta e desenvolvimento de fármacos pela sua capacidade de imitar o ambiente in vivo com bastante precisão. Este estudo mostrou que o modelo de cultura 3D é um melhor preditor da resposta in vivo aos fatores de crescimento em comparação com o modelo de cultura 2D.