Samsodien H
Introdução A nevirapina (NV) é um inibidor não nucleósido da transcriptase reversa utilizado em associação com outros medicamentos antirretrovirais para o tratamento de infeções pelo Vírus da Imunodeficiência Humana (VIH). A NV inibe directamente a actividade da transcriptase reversa, suprimindo assim a replicação do ADN do vírus VIH e é conhecida por prevenir a transmissão do VIH da mãe para o filho. Uma dose única de NV administrada à mãe no início do trabalho de parto e ao bebé nas 72 horas seguintes ao parto reduziu quase para metade a taxa de transmissão do VIH. Como a NV é administrada apenas uma vez à mãe e ao bebé, é relativamente barata e fácil de administrar. O NV é praticamente insolúvel em água com uma solubilidade aquosa de 0,1 mg/ml-1 (pH 7, temperatura 37°C). De acordo com o índice biofarmacêutico e de classificação, o NV é um fármaco de classe II, ou seja, apresenta uma elevada permeabilidade e uma baixa solubilidade. Presume-se que a lenta taxa de dissolução do NV é a etapa que limita a taxa de absorção do fármaco. Os cocristais, uma estrutura cristalina contendo dois ou mais componentes diferentes numa proporção estequiométrica definida, foram estudados para melhorar a solubilidade, a biodisponibilidade e a velocidade de dissolução do NV. Os cocristais são formados entre um ingrediente farmacêutico molecular ou iónico ativo (API) e um cocristal, em que cada componente é um sólido à temperatura ambiente e também produz um produto sólido à temperatura ambiente. Os co-treinadores foram seleccionados de acordo com as regras de ligação de hidrogénio para facilitar a ligação não covalente entre as moléculas. Os cocristais NV foram formados com compostos geralmente considerados seguros (GRAS), nomeadamente sacarina (SC), ácido tac-tartárico (TTA), ácido maleico (MLE) e ácido salicílico (SLI). O ácido glutárico (GLT) também tem sido utilizado como co-treinador para formar co-cristais de NV. O NVSC e o NVSLI formaram cocristais com uma proporção de 2:1 de NV para o co-treinador em questão. O NVTTA, o NVMLE e o NVGLT formaram cocristais com uma proporção de 1:1 de NV para o co-treinador em questão. Num estudo semelhante, a formulação de cocristais de fenofibrato à base de nicotinamida por diferentes métodos na proporção molar de 1:1 foi utilizada para formular complexos moleculares por amassamento, cristalização da solução, adição de antissolventes e moagem de gotas de solvente. . Os complexos moleculares preparados foram caracterizados por difratometria de raios X de pó, calorimetria de varrimento, espectroscopia de infravermelhos com transformada de Fourier (FTIR), espectroscopia de ressonância magnética nuclear e análise de dissolução in vitro. As técnicas analíticas têm sido muito utilizadas para distinguir diferentes formas de cristais, como polimorfos, clatratos, hidratos e co-cristais. O FTIR também tem sido utilizado para monitorizar a formação de cocristais e a deteção de um único bloco de construção. Materiais e Métodos Microscopia a quente A integridade e pureza de todos os co-cristais foram verificadas através de microscopia a quente (HSM) antes da experiência.Espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier A espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier (FTIR) foi realizada para confirmar a identidade dos cinco cocristais e para determinar se o FTIR poderia ser utilizado em futuros estudos de cocristais para identificar formas de cocristais. Teste de dissolução O perfil de dissolução do NV melhorou tanto para os cocristais como para as misturas físicas. O NVGLT foi o único cocristal que apresentou melhores resultados que o NV e a sua mistura física. Contudo, o NVGLT e a sua mistura física ainda não atendiam aos padrões da Farmacopeia Britânica 2005 (BP), uma vez que 75% das substâncias não foram dissolvidas em 45 minutos [6-8]. Apenas 30% e 26% entraram em solução ao fim de 45 minutos para o cocristal NVGLT e a mistura NV:GLT, respetivamente. Testes antivirais São necessários testes antivirais in vitro dos co-cristais para confirmar que a nova forma cristalina de NV tem actividade comparável ou melhorada contra o VIH-1. Os cocristais não apresentaram citotoxicidade significativa para as células 293T, uma vez que a viabilidade percentual se manteve acima dos 50% para todos os cocristais testados. O valor de citotoxicidade-50 (CC50) é superior à concentração máxima testada, indicando a inexistência de efeito citotóxico para as células 293T. Estas gamas de concentração foram, por isso, utilizadas no rastreio da atividade anti-HIV-1. Ao testar a actividade antiviral, o NICD confirmou que nem os co-formadores nem o solvente DMSO inibiram o VIH-1. Isto indica que a actividade inibitória apresentada pelos co-cristais é directamente o resultado da porção NV da molécula. O NVSC e o NVSLI apresentaram um IC50 médio de 0,037 mM, que diferiu significativamente do NV puro (0,083 mM), com valores de p ​​de 0,002. O NVMLE e o NVGLT apresentaram valores médios de IC50 de 0,055 mM e 0,054 mM significativamente diferentes do NV puro com valores de p de 0,026 e 0,019, respetivamente. Conclusão Os resultados aqui apresentados indicam que o FTIR é um método analítico apropriado para identificar cocristais, com excepção dos cocristais com uma proporção molecular de 2: 1. Uma vez que o co-treinador e o NV são mantidos juntos por ligações de hidrogénio fracas, os picos deveriam ocorrer nas ligações C = O, OH e NH. O software Spectrum utilizado neste estudo apenas conseguiu detetar as ligações C = O. A dissolução do NV foi melhorada na presença de coformadores individuais, tanto na forma de cocristal como na forma de mistura física. O NVGLT foi o único cocristal que apresentou melhores resultados que a sua mistura física. Estudos de solubilidade indicam que a escolha dos co-treinadores para investigação futura poderá ser baseada nos valores de pKa e ponto de fusão. A HPLC provou ser um método de análise mais preciso e exato do que a espectrometria UV, produzindo resultados mais fiáveis. Por fim, a atividade antiviral do NVSC, NVSLI, NVMLE e NVGLT HIV-1 diferiu significativamente do NV puro em comparação com o NVTTA.Teste de dissolução O perfil de dissolução do NV melhorou tanto para os cocristais como para as misturas físicas. O NVGLT foi o único cocristal que apresentou melhores resultados que o NV e a sua mistura física. Contudo, o NVGLT e a sua mistura física ainda não atendiam aos padrões da Farmacopeia Britânica 2005 (BP), uma vez que 75% das substâncias não foram dissolvidas em 45 minutos [6-8]. Apenas 30% e 26% entraram em solução ao fim de 45 minutos para o cocristal NVGLT e a mistura NV:GLT, respetivamente. Testes antivirais São necessários testes antivirais in vitro dos cocristais para confirmar que a nova forma cristalina de NV tem actividade comparável ou melhorada contra o VIH-1. Os cocristais não apresentaram citotoxicidade significativa para as células 293T, uma vez que a viabilidade percentual se manteve acima dos 50% para todos os cocristais testados. O valor de citotoxicidade-50 (CC50) é superior à concentração máxima testada, indicando a inexistência de efeito citotóxico para as células 293T. Estas gamas de concentração foram, por isso, utilizadas no rastreio da atividade anti-HIV-1. Ao testar a actividade antiviral, o NICD confirmou que nem os co-formadores nem o solvente DMSO inibiram o VIH-1. Isto indica que a actividade inibitória apresentada pelos co-cristais é directamente o resultado da porção NV da molécula. O NVSC e o NVSLI apresentaram um IC50 médio de 0,037 mM, que diferiu significativamente do NV puro (0,083 mM), com valores de p ​​de 0,002. O NVMLE e o NVGLT apresentaram valores médios de IC50 de 0,055 mM e 0,054 mM significativamente diferentes do NV puro com valores de p de 0,026 e 0,019, respetivamente. Conclusão Os resultados aqui apresentados indicam que o FTIR é um método analítico apropriado para identificar cocristais, com excepção dos cocristais com uma proporção molecular de 2: 1. Uma vez que o co-treinador e o NV são mantidos juntos por ligações de hidrogénio fracas, os picos deveriam ocorrer nas ligações C = O, OH e NH. O software Spectrum utilizado neste estudo apenas conseguiu detetar as ligações C = O. A dissolução do NV foi melhorada na presença de coformadores individuais, tanto na forma de cocristal como na forma de mistura física. O NVGLT foi o único cocristal que apresentou melhores resultados que a sua mistura física. Estudos de solubilidade indicam que a escolha dos co-treinadores para investigação futura poderá ser baseada nos valores de pKa e ponto de fusão. A HPLC provou ser um método de análise mais preciso e exato do que a espectrometria UV, produzindo resultados mais fiáveis. Por fim, a atividade antiviral do NVSC, NVSLI, NVMLE e NVGLT HIV-1 diferiu significativamente do NV puro em comparação com o NVTTA.Teste de dissolução O perfil de dissolução do NV melhorou tanto para os cocristais como para as misturas físicas. O NVGLT foi o único cocristal que apresentou melhores resultados que o NV e a sua mistura física. Contudo, o NVGLT e a sua mistura física ainda não atendiam aos padrões da Farmacopeia Britânica 2005 (BP), uma vez que 75% das substâncias não foram dissolvidas em 45 minutos [6-8]. Apenas 30% e 26% entraram em solução ao fim de 45 minutos para o cocristal NVGLT e a mistura NV:GLT, respetivamente. Testes antivirais São necessários testes antivirais in vitro dos co-cristais para confirmar que a nova forma cristalina de NV tem actividade comparável ou melhorada contra o VIH-1. Os cocristais não apresentaram citotoxicidade significativa para as células 293T, uma vez que a viabilidade percentual se manteve acima dos 50% para todos os cocristais testados. O valor de citotoxicidade-50 (CC50) é superior à concentração máxima testada, não indicando qualquer efeito citotóxico para as células 293T. Estas gamas de concentração foram, por isso, utilizadas no rastreio da atividade anti-HIV-1. Ao testar a actividade antiviral, o NICD confirmou que nem os co-formadores nem o solvente DMSO inibiram o VIH-1. Isto indica que a actividade inibitória apresentada pelos co-cristais é directamente o resultado da porção NV da molécula. O NVSC e o NVSLI apresentaram um IC50 médio de 0,037 mM, que diferiu significativamente do NV puro (0,083 mM), com valores de p ​​de 0,002. O NVMLE e o NVGLT apresentaram valores médios de IC50 de 0,055 mM e 0,054 mM significativamente diferentes do NV puro com valores de p de 0,026 e 0,019, respetivamente. Conclusão Os resultados aqui apresentados indicam que o FTIR é um método analítico apropriado para identificar cocristais, com excepção dos cocristais com uma proporção molecular de 2: 1. Uma vez que o co-treinador e o NV são mantidos juntos por ligações de hidrogénio fracas, os picos deveriam ocorrer nas ligações C = O, OH e NH. O software Spectrum utilizado neste estudo apenas conseguiu detetar as ligações C = O. A dissolução do NV foi melhorada na presença de coformadores individuais, tanto na forma de cocristal como na forma de mistura física. O NVGLT foi o único cocristal que apresentou melhores resultados que a sua mistura física. Estudos de solubilidade indicam que a escolha dos co-treinadores para investigação futura poderá ser baseada nos valores de pKa e ponto de fusão. A HPLC provou ser um método de análise mais preciso e exato do que a espectrometria UV, produzindo resultados mais fiáveis. Por fim, a atividade antiviral do NVSC, NVSLI, NVMLE e NVGLT HIV-1 diferiu significativamente do NV puro em comparação com o NVTTA.Apenas 30% e 26% entraram em solução ao fim de 45 minutos para o cocristal NVGLT e a mistura NV:GLT, respetivamente. Testes antivirais São necessários testes antivirais in vitro dos co-cristais para confirmar que a nova forma cristalina de NV tem actividade comparável ou melhorada contra o VIH-1. Os cocristais não apresentaram citotoxicidade significativa para as células 293T, uma vez que a viabilidade percentual se manteve acima dos 50% para todos os cocristais testados. O valor de citotoxicidade-50 (CC50) é superior à concentração máxima testada, indicando a inexistência de efeito citotóxico para as células 293T. Estas gamas de concentração foram, por isso, utilizadas no rastreio da atividade anti-HIV-1. Ao testar a actividade antiviral, o NICD confirmou que nem os co-formadores nem o solvente DMSO inibiram o VIH-1. Isto indica que a actividade inibitória apresentada pelos co-cristais é directamente o resultado da porção NV da molécula. O NVSC e o NVSLI apresentaram um IC50 médio de 0,037 mM, que diferiu significativamente do NV puro (0,083 mM), com valores de p ​​de 0,002. O NVMLE e o NVGLT apresentaram valores médios de IC50 de 0,055 mM e 0,054 mM significativamente diferentes do NV puro com valores de p de 0,026 e 0,019, respetivamente. Conclusão Os resultados aqui apresentados indicam que o FTIR é um método analítico apropriado para identificar cocristais, com excepção dos cocristais com uma proporção molecular de 2: 1. Uma vez que o co-treinador e o NV são mantidos juntos por ligações de hidrogénio fracas, os picos deveriam ocorrer nas ligações C = O, OH e NH. O software Spectrum utilizado neste estudo apenas conseguiu detetar as ligações C = O. A dissolução do NV foi melhorada na presença de coformadores individuais, tanto na forma de cocristal como na forma de mistura física. O NVGLT foi o único cocristal que apresentou melhores resultados que a sua mistura física. Estudos de solubilidade indicam que a escolha de co-treinadores para investigação futura poderá possivelmente ser baseada nos valores de pKa e ponto de fusão. A HPLC provou ser um método de análise mais preciso e exato do que a espectrometria UV, produzindo resultados mais fiáveis. Por fim, a atividade antiviral do NVSC, NVSLI, NVMLE e NVGLT HIV-1 diferiu significativamente do NV puro em comparação com o NVTTA.Apenas 30% e 26% entraram em solução ao fim de 45 minutos para o cocristal NVGLT e a mistura NV:GLT, respetivamente. Testes antivirais São necessários testes antivirais in vitro dos co-cristais para confirmar que a nova forma cristalina de NV tem actividade comparável ou melhorada contra o VIH-1. Os cocristais não apresentaram citotoxicidade significativa para as células 293T, uma vez que a viabilidade percentual se manteve acima dos 50% para todos os cocristais testados. O valor de citotoxicidade-50 (CC50) é superior à concentração máxima testada, indicando a inexistência de efeito citotóxico para as células 293T. Estas gamas de concentração foram, por isso, utilizadas no rastreio da atividade anti-HIV-1. Ao testar a actividade antiviral, o NICD confirmou que nem os co-formadores nem o solvente DMSO inibiram o VIH-1. Isto indica que a actividade inibitória apresentada pelos co-cristais é directamente o resultado da porção NV da molécula. O NVSC e o NVSLI apresentaram um IC50 médio de 0,037 mM, que diferiu significativamente do NV puro (0,083 mM), com valores de p ​​de 0,002. O NVMLE e o NVGLT apresentaram valores médios de IC50 de 0,055 mM e 0,054 mM significativamente diferentes do NV puro com valores de p de 0,026 e 0,019, respetivamente. Conclusão Os resultados aqui apresentados indicam que o FTIR é um método analítico apropriado para identificar cocristais, com excepção dos cocristais com uma proporção molecular de 2: 1. Uma vez que o co-treinador e o NV são mantidos juntos por ligações de hidrogénio fracas, os picos deveriam ocorrer nas ligações C = O, OH e NH. O software Spectrum utilizado neste estudo apenas conseguiu detetar as ligações C = O. A dissolução do NV foi melhorada na presença de coformadores individuais, tanto na forma de cocristal como na forma de mistura física. O NVGLT foi o único cocristal que apresentou melhores resultados que a sua mistura física. Estudos de solubilidade indicam que a escolha de co-treinadores para investigação futura poderá possivelmente ser baseada nos valores de pKa e ponto de fusão. A HPLC provou ser um método de análise mais preciso e exato do que a espectrometria UV, produzindo resultados mais fiáveis. Por fim, a atividade antiviral do NVSC, NVSLI, NVMLE e NVGLT HIV-1 diferiu significativamente do NV puro em comparação com o NVTTA.Isto indica que a actividade inibitória apresentada pelos co-cristais é directamente o resultado da porção NV da molécula. O NVSC e o NVSLI apresentaram um IC50 médio de 0,037 mM, que diferiu significativamente do NV puro (0,083 mM), com valores de p ​​de 0,002. O NVMLE e o NVGLT apresentaram valores médios de IC50 de 0,055 mM e 0,054 mM significativamente diferentes do NV puro com valores de p de 0,026 e 0,019, respetivamente. Conclusão Os resultados aqui apresentados indicam que o FTIR é um método analítico apropriado para identificar cocristais, com excepção dos cocristais com uma proporção molecular de 2: 1. Uma vez que o co-treinador e o NV são mantidos juntos por ligações de hidrogénio fracas, os picos deveriam ocorrer nas ligações C = O, OH e NH. O software Spectrum utilizado neste estudo apenas conseguiu detetar as ligações C = O. A dissolução do NV foi melhorada na presença de coformadores individuais, tanto na forma de cocristal como na forma de mistura física. O NVGLT foi o único cocristal que apresentou melhores resultados que a sua mistura física. Estudos de solubilidade indicam que a escolha dos co-treinadores para investigação futura poderá ser baseada nos valores de pKa e ponto de fusão. A HPLC provou ser um método de análise mais preciso e exato do que a espectrometria UV, produzindo resultados mais fiáveis. Por fim, a atividade antiviral do NVSC, NVSLI, NVMLE e NVGLT HIV-1 diferiu significativamente do NV puro em comparação com o NVTTA.Isto indica que a actividade inibitória apresentada pelos co-cristais é directamente o resultado da porção NV da molécula. O NVSC e o NVSLI apresentaram um IC50 médio de 0,037 mM, que diferiu significativamente do NV puro (0,083 mM), com valores de p ​​de 0,002. O NVMLE e o NVGLT apresentaram valores médios de IC50 de 0,055 mM e 0,054 mM significativamente diferentes do NV puro com valores de p de 0,026 e 0,019, respetivamente. Conclusão Os resultados aqui apresentados indicam que o FTIR é um método analítico apropriado para identificar cocristais, com excepção dos cocristais com uma proporção molecular de 2: 1. Uma vez que o co-treinador e o NV são mantidos juntos por ligações de hidrogénio fracas, os picos deveriam ocorrer nas ligações C = O, OH e NH. O software Spectrum utilizado neste estudo apenas conseguiu detetar as ligações C = O. A dissolução do NV foi melhorada na presença de coformadores individuais, tanto na forma de cocristal como na forma de mistura física. O NVGLT foi o único cocristal que apresentou melhores resultados que a sua mistura física. Estudos de solubilidade indicam que a escolha dos co-treinadores para investigação futura poderá ser baseada nos valores de pKa e ponto de fusão. A HPLC provou ser um método de análise mais preciso e exato do que a espectrometria UV, produzindo resultados mais fiáveis. Por fim, a atividade antiviral do NVSC, NVSLI, NVMLE e NVGLT HIV-1 diferiu significativamente do NV puro em comparação com o NVTTA.
English 
Spanish 
Chinese 
Russian 
German 
French 
Japanese 
Hindi