Elhag DE
Introdução Em muitas partes do mundo as picadas de escorpião são um verdadeiro problema de saúde pública devido à elevada incidência ou gravidade dos envenenamentos ou por estes dois motivos em simultâneo. Muitos escorpiões potencialmente perigosos habitam países subdesenvolvidos ou em desenvolvimento e não são reportados numerosos envenenamentos. Oficialmente, estima-se que ocorram 1,2 milhões de picadas de escorpiões por ano em todo o mundo, levando a 3.250 mortes (0,27%). O Relatório Anual de 2014 do Sistema Nacional de Dados sobre Venenos (NPDS) da Associação Americana de Centros de Controlo de Venenos reportou 16.440 menções de casos de envenenamento por escorpiões. No entanto, devido à subnotificação, esta é provavelmente uma subestimação do verdadeiro número de picadas. Os venenos de escorpião contêm muitos componentes bioativos. Vários dos peptídeos de cadeia longa demonstraram ser responsáveis ??por efeitos neurotóxicos. Estas toxinas são polipeptídeos básicos com pesos moleculares de cerca de 7.000 kD, sem ação enzimática e demonstraram afetar a permeabilidade iónica das células excitáveis. Estas preparações estão incluídas na Lista de Medicamentos Essenciais da OMS e devem fazer parte de qualquer pacote de cuidados de saúde primários onde ocorram picadas de escorpião. O antiveneno é produzido através da ordenha do veneno do Escorpião desejado, injetando o veneno ordenhado num cavalo, ovelha, coelho ou cabra para estimular o sistema imunitário do animal. Existe hoje uma necessidade urgente de garantir a disponibilidade de antivenenos seguros, eficazes e acessíveis, especialmente para os países em desenvolvimento, e de melhorar o controlo regulamentar sobre o fabrico, importação e venda de antivenenos. O veneno do escorpião contém peptídeos neurotóxicos que interagem com os canais iónicos, causando danos maciços no sistema nervoso. Graças a esta interação, o veneno do escorpião pode provocar excitação nos nervos e músculos, secreção hormonal e distúrbios no controlo do equilíbrio de sal e água e na regulação da pressão arterial. Os sintomas clínicos durante o envenenamento indicam uma estimulação geral dos sistemas nervoso autónomo, somático e periférico. A gravidade da intoxicação por escorpiões e o aumento do risco de mortalidade, principalmente em crianças, são atribuídos principalmente à patologia cardiorrespiratória. Materiais e Reagentes Ensaios químicos Determinação do pH: O pH das amostras selecionadas foi medido utilizando um pHmetro apropriado calibrado imediatamente antes da sua utilização, em comparação com as soluções tampão padrão (pH 4 e pH 7). A obrigação da OMS de produzir antiveneno indica que o pH do antiveneno deve estar entre 6 e 7. Determinação do m-cresol: Preparação da solução tampão pH 9 Solução A: 6,18 g de ácido bórico e 7,45 g de cloreto de potássio (0,1 M ) para ser dissolvido em 1000 ml de água. Solução B: hidróxido de sódio 0,1 N R. A 1000 ml da solução A foram adicionados 400 ml da solução B, o hidróxido de sódio foi adicionado gradualmente à mistura até atingir o pH 9.Solução de ferricianeto de potássio Foram lavados exactamente 5 g de ferricianeto de potássio com 3 ml de água e depois dissolvidos e diluídos com água até 100 ml (esta preparação foi preparada imediatamente antes da sua utilização). Solução de aminoantipirina R: 100 mg de aminoantipirina foram dissolvidos em 100 ml de solução tampão pH 9. Preparação da amostra Foram preparados dois grupos de teste. O primeiro grupo é composto por seis bolbos de antiveneno que foram selecionados aleatoriamente do lote de antiveneno escorpião armazenado em condições reais (3 ± 2 °C). O segundo grupo, composto por seis ampolas de anti-soro, foi submetido a condições aceleradas (25±3°C, HR75%). 0,2 ml de cada amostra (contém até 0,35% de m-cresol) foram diluídos em 3,5 ml de água para dar uma concentração final de (200 µg/ml). Procedimento Um total de sete gobelés foram rotulados para utilização, o primeiro foi definido como branco. Foram adicionados mais seis gobelés de 0,5 ml das amostras preparadas a cada gobelé. De seguida, foram adicionados sucessivamente 5 ml de aminoantipirina e 5 ml de ferricianeto de potássio a cada gobelé. As amostras de teste preparadas foram deixadas durante 10 minutos à temperatura ambiente, de seguida cada absorvância da amostra foi medida a 540 nm, utilizando um espectrofotómetro UV/vis. Standard m-cresol preparation The stock solution of M-cresol solution (250 µg / ml) was prepared by weighing exactly 1 g of m-cresol and transferring it to a 1-liter volumetric flask and the volume was adjusted to the mark using distilled água. Foram retirados exatamente 2,5 ml e completados até 10 ml. Foram feitas uma série de diluições apropriadas para construir a curva padrão e as concentrações das amostras foram determinadas a partir da curva padrão. Determinação do teor de proteína total/ determinação do teor de Albumina: A solução antiveneno foi diluída com uma solução de sacarose a 25% em tampão fosfato 0,01 M, pH 7, até um teor de proteína de 10 mg/ml. Amostras de 10 µl do antiveneno foram aplicadas nas membranas de gel de poliacrilamida na câmara de separação e submetidas a eletroforese. Uma amostra padrão de albumina de 1 mg/ml foi analisada simultaneamente com amostras de soro antiveneno. O gel foi então retirado da câmara de separação e colocado na câmara de revelação e a revelação foi realizada utilizando a mesma máquina de acordo com o seguinte método programado. As mobilidades electroforéticas do antiveneno e da albumina foram comparadas após coloração com azul de Coomassie. Resultados Teste de pH: as medições de pH de ampolas selecionadas aleatoriamente após terem sido submetidas a duas condições de armazenamento diferentes (real e acelerada) mostraram que os valores eram comparáveis ??e dentro do intervalo aceitável indicado para o antiveneno produzido. A obrigação da OMS de produzir antiveneno, dizia que o PH do antiveneno deveria estar entre 6 e 7. As medições do conteúdo de m-cresol das ampolas foram previamente armazenadas em condições adequadas de armazenamento (real, 3 ± 2ºC) e em condições aceleradas (25 ± 2ºC). 3ºC, HR75%).mostraram que houve uma pequena alteração na concentração de m-cresol, mas esta alteração não foi significativa nem saiu do intervalo de limites aceitáveis ??indicados no folheto da ampola. Medição do teor proteico do antiveneno polivalente de escorpião obtido aleatoriamente do lote e mantido nas duas condições de armazenamento selecionadas, condição de armazenamento em tempo real (3 ± 2ºC) e condição de armazenamento acelerado (25 ± 3ºC, HR75%). mostraram que o teor proteico nas duas classes de amostras era comparável. As orientações da OMS referem que a concentração total de proteínas nos antivenenos não deve, preferencialmente, exceder 10 g/dl, a menos que um teor proteico mais elevado seja justificado e autorizado pela autoridade competente. Conclusão O presente trabalho sugeriu que a manutenção do antiveneno à temperatura e humidade especificadas e quando exposto à luz durante um longo período de tempo não afeta o antiveneno em termos de esterilidade ou eficácia.
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