Abstrato

Desenvolvimento de um Método Analítico para a Determinação Plasmática de Cinco Antiepiléticos e seus Metabolitos por HPLC: Comparação com Métodos Imunoanalíticos

Kaouthar Louati, Sarah Mahfoudhi e Fathi Safta

Dado que a bioanálise emergiu como uma ferramenta crítica no processo de descoberta e desenvolvimento de medicamentos, e é desejável a disponibilidade de metodologias analíticas menos dispendiosas, mais rápidas e mais simples para apoiar estudos de rastreio de interacções medicamentosas com validação estatística numa vasta gama de concentrações , o objectivo deste O trabalho consiste em desenvolver um método simples, rápido e económico de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência para a quantificação simultânea da concentração plasmática humana de seis medicamentos antiepilépticos frequentemente utilizados na prática clínica (fenobarbital, lamotrigina, oxcarbazepina, mono-hidroxicarbazepina, carbamazepina e fenitoína). . O clonazepam foi utilizado como padrão interno. A preparação da amostra consistiu numa etapa de desproteinização com acetonitrila. Após a extração, os analitos foram separados numa coluna de fase reversa C18 termostatizada a 25ºC. A fase móvel era constituída por 50% de tampão fosfato (pH=7,5) e 50% de metanol/acetonitrila (80:20, v/v), bombeada isocraticamente a 1 mL/min. O detetor UV foi ajustado a 215 nm. O tempo total de execução foi de apenas 10 minutos. Os valores de rendimento de extração situaram-se entre os 84% ??e os 99%. Todos estes antiepiléticos são separados com bons formatos de pico e um factor de resolução superior a 2. O novo método revelou-se simples e rápido. As curvas de calibração foram lineares com coeficientes de regressão superiores a 0,998. O CV% de precisão intra e inter-dia variou entre 0,91% e 5,69%. O valor do viés para a precisão variou entre 2,42% a 1,27%. As recuperações médias de extração absoluta nos níveis de amostra de controlo de qualidade baixo, médio e alto variaram entre 84,17% e 99,02%. Este método bioanalítico foi aplicado com sucesso a amostras reais de plasma de 26 doentes epiléticos. Os nossos resultados foram comparados com os obtidos por métodos de imunoensaio no laboratório hospitalar de bioquímica-toxicologia FATTOUMA e no Centro de Farmacovigilância da Tunísia. O método desenvolvido parece ser uma ferramenta adequada para a monitorização terapêutica de rotina de medicamentos e também para apoiar outros estudos clínicos de base farmacocinética.